如何修|煉成流式高手 -方案設(shè)計（上）

我們時常會遇到，明明染色Marker都來自一篇文獻(xiàn)，但是后實驗結(jié)果卻變成“買家秀與賣家秀”。

產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因是什么？以及我們?yōu)槭裁匆绾蝺?yōu)化我們的染色方案呢？我們先看具體的例子。

方案1與方案2，所選擇的marker都*一致，所選用的熒光素種類一樣，但是搭配不一樣。那么我們看看同一個樣本，后各個細(xì)胞亞群的結(jié)果一樣嗎？

方案1與方案2，CD4+CD25+ 的百分比接近（A與C比較），可是CD8+CD69+的百分比卻相差很多（C與D比較）。

造成這種原因其實就是我們平時說到到spreading現(xiàn)象。

Nguyen, Richard, et al. "Quantifying spillover spreading for comparing instrument performance and aiding in multicolor panel design." Cytometry Part A 83.3 (2013): 306-315.

如果要優(yōu)化流式染色方案中，由spreading現(xiàn)象產(chǎn)生的分辨率降低，我們可以使用SWOFF方法。通過如下流程，就可以很快找出究竟是由于那個通道的配色不合理，導(dǎo)致分辨能力下降。

在不同的檢測平臺，元件的光電轉(zhuǎn)化效率會直接影響儀器總體分辨率。

不僅如此，科技的進(jìn)步帶來的還有更小的spreading現(xiàn)象，這使得配色也更加的輕松，結(jié)果也更加的準(zhǔn)確。

你想知道如何檢查自己的染色方案么？利用SWOFF的方法，可以幫您發(fā)現(xiàn)并且優(yōu)化，使檢測更加準(zhǔn)確。點(diǎn)擊下方閱讀全文，獲取SWOFF的詳細(xì)步驟。